Inmunofenotipificación:
En medicina veterinaria, actualmente el linfoma canino se divide en dos inmunofenotipos principales, linfocitos B y T. Tradicionalmente, 2/3 de los perros con linfoma se clasifican como células B y 1/3 son células T. Un porcentaje menor (<2%) se considera celda nula. La inmunofenotipificación de los pacientes con linfoma se puede lograr mediante una variedad de pruebas que incluyen inmunohistoquímica, inmunocitoquímica, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y citometría de flujo.

  • Inmunohistoquímica (IHC): IHC todavía se considera el estándar de oro para determinar el inmunofenotipo, utilizando un panel de marcadores que se unen a proteínas de superficie en células B (CD79a, CD21, Pax5) o células T (CD5, CD3, CD4, CD8). Esto requiere tejido obtenido a través de una biopsia por sacabocados, una biopsia de tru-cut o una extirpación ganglionar.
  • Inmunocitoquimica (ICC): ICC utiliza los mismos anticuerpos que IHC pero en muestras de citología, lo que ofrece una manera más rentable para determinar el inmunofenotipo. La distinción es que la arquitectura nodal no se evalúa, por lo que no se puede determinar el grado y el subtipo específico (p. Ej., Zona T indolente, células B grandes difusas, etc.) del linfoma.
  • Reacción en cadena de la polimerasa (PCR): esta es una reacción enzimática repetitiva que genera ~ 109 copias de una secuencia de ADN particular de 1 copia original, por lo que una pequeña muestra puede producir resultados de diagnóstico. Utiliza polimerasas termoestables y cebadores específicos de secuencia. Esta prueba se usa comúnmente en la detección de enfermedades infecciosas en medicina humana y veterinaria. PCR para el reordenamiento del receptor de antígeno (PARR): la clonalidad es el sello distintivo de la malignidad y PARR amplifica las regiones variables de los genes de inmunoglobulina y los genes del receptor de células T para detectar la presencia de una población clonal. PARR no solo confirma la clonalidad y, por lo tanto, el cáncer, sino que también determinará el inmunofenotipo del linfoma y la leucemia linfoide. Las muestras específicas que se pueden analizar incluyen: sangre periférica, ganglios linfáticos, médula ósea, masa mediastínica, líquido de la cavidad corporal y líquido cefalorraquídeo.1
  • Citometría de flujo (FCM): FCM se utiliza de forma rutinaria en la medicina basada en médicos en las primeras etapas del diagnóstico de neoplasias linfoides malignas e implica el uso de anticuerpos monoclonales marcados con fluorescencia. Esto permite la evaluación de una gran población de células para determinar el tamaño de las células, identificar la expresión aberrante del marcador de superficie y, por lo tanto, determinar el inmunofenotipo de las células normales y atípicas en la muestra., FCM requiere muestras frescas (células vivas) y es disponible comercialmente a través de varios laboratorios de diagnóstico importantes.1

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