Иммунофенотипирование лимфомы собак | Ветеринарный блог CE VETgirl

Иммунофенотипирование:
В ветеринарии в настоящее время лимфома собак подразделяется на два основных иммунофенотипа: B- и T-клеточные. Традиционно 2/3 собак с лимфомой классифицируются как B-клетки, а 1/3 - как T-клетки. Незначительный процент (<2%) считается нулевой ячейкой. Иммунофенотипирование пациентов с лимфомой может быть достигнуто с помощью различных тестов, включая иммуногистохимию, иммуноцитохимию, полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и проточную цитометрию.

Иммуногистохимия (ИГХ): ИГХ по-прежнему считается золотым стандартом для определения иммунофенотипа с использованием панели маркеров, которые связываются с поверхностными белками либо на В-клетках (CD79a, CD21, Pax5), либо на Т-клетках (CD5, CD3, CD4, CD8). Для этого требуется ткань, полученная либо с помощью пункционной биопсии, биопсии с разрезом, либо удалением узлов.
Иммуноцитохимическая (ICC): ICC использует те же антитела, что и IHC, но в цитологических образцах, тем самым предлагая более экономичный способ определения иммунофенотипа. Различие заключается в том, что узловая архитектура не оценивается, поэтому степень и конкретный подтип (например, вялотекущая Т-зона, диффузная большая В-клетка и т. Д.) Лимфомы не могут быть определены.
Полимеразной цепной реакции (ПЦР): это повторяющаяся ферментативная реакция, которая генерирует ~ 10⁹ копии определенной последовательности ДНК из 1 исходной копии, поэтому небольшой образец может дать диагностические результаты. В нем используются термостойкие полимеразы и праймеры, специфичные для последовательности. Этот тест обычно используется для выявления инфекционных заболеваний в медицине и ветеринарии. ПЦР для перестройки рецептора антигена (PARR): клональность является признаком злокачественности, а PARR амплифицирует вариабельные области генов иммуноглобулинов и генов рецепторов Т-клеток для обнаружения присутствия клональной популяции. PARR не только подтверждает клональность и, следовательно, рак, но также определяет иммунофенотип лимфомы и лимфолейкоза. Конкретные образцы, которые можно проанализировать, включают: периферическую кровь, лимфатический узел, костный мозг, массу средостения, жидкость полости тела и спинномозговую жидкость.¹
Проточная цитометрия (FCM): FCM обычно используется в медицине на ранних этапах диагностики лимфоидных злокачественных новообразований и включает использование флуоресцентно меченных моноклональных антител. Это позволяет проводить оценку большой популяции клеток с целью определения размеров клеток, выявления аберрантной экспрессии поверхностных маркеров и, таким образом, определения иммунофенотипа как нормальных, так и атипичных клеток в образце. FCM требует свежих образцов (живых клеток) и является коммерчески доступны в нескольких крупных диагностических лабораториях.¹